淡豆豉作為一味傳統中藥，其質量標準隨著科技發展而不斷完善。2025版《中國藥典》對淡豆豉的含量測定提出了新的要求，本文基於小黄鸭福利导航EClassical 3200高效液相色譜係統和Supersil ODS2色譜柱，介紹2025版《中國藥典》淡豆豉中活性成分的測定方法，並對比分析2025版藥典的主要變化。

1、淡豆豉的藥物作用概述

淡豆豉為豆科植物大豆的成熟種子經發酵加工而成的製品，其性味苦、辛、涼，歸肺、胃經，具有解表、除煩、宣發鬱熱的功效。臨床上主要用於治療感冒、寒熱頭痛、煩躁胸悶、虛煩不眠等症。現代藥理研究表明，淡豆豉中的主要活性成分為大豆苷元和染料木素，二者均屬於異黃酮類化合物。這些成分具有解熱、鎮靜神經的作用，與淡豆豉傳統功效中的“治療虛煩不眠”相吻合。此外，研究還發現這些成分具有一定的抗氧化和調節內分泌功能。

                                              大豆苷元                                    染料木素

2、2025版與2020版《中國藥典》淡豆豉標準的主要變化

2025版《中國藥典》在淡豆豉的質量標準上進行了重要修訂，其中顯著的變化是含量測定限度的提高。

含量限度大幅提升：2025版藥典規定，淡豆豉中大豆苷元和染料木素的總量不得少於0.10%，而2020版藥典的限度為不得少於0.040%，標準提高了2.5倍。這一變化反映了對淡豆豉藥材質量要求的顯著提高。

檢測方法更加嚴謹：新版藥典在係統適用性試驗中明確要求，理論板數按大豆苷元峰和染料木素峰計算均不低於5000，確保色譜分離效果滿足定量分析要求。

安全性控製加強：2025版藥典在中藥方麵係統性加強了對禁用農藥、重金屬及有害元素等外源性有害物質的限量控製，這些變化同樣適用於淡豆豉的標準。

3、淡豆豉中大豆苷元與染料木素的HPLC測定方法

1、色譜條件色譜係統：EClassical 3200係統配D3230二極管陣列檢測器；

色譜柱：Supersil ODS2 (ID 4.6 mm×250 mm，5 µm，訂貨號31113004)；

流動相：乙腈/1%冰醋酸水溶液 = 25/75 (V/V)；

流速：1.0 mL/min；

檢測波長：260 nm；

柱溫：35℃；

進樣量：10 µL；

1、色譜條件色譜係統：

EClassical 3200係統配D3230二極管陣列檢測器；色譜柱：Supersil ODS2 (ID 4.6 mm×250 mm，5 µm，訂貨號31113004)；流動相：乙腈/1%冰醋酸水溶液 = 25/75 (V/V)；流速：1.0 mL/min；檢測波長：260 nm；柱溫：35℃；進樣量：10 µL；

2、係統適用性要求

理論板數按大豆苷元峰和染料木素峰計算均不低於5000。

3、對照品溶液製備

精密稱取大豆苷元、染料木素對照品各10 mg，分別置於10 mL容量瓶中，加甲醇溶解並稀釋至刻度，搖勻，作為儲備液。分別精密量取上述儲備液各1mL，置於同一50 mL容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，製成每1 mL各含20 µg的混合對照品溶液。

4、供試品溶液製備

取淡豆豉粉末(過二號篩)約1 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25 mL，稱定重量，加熱回流1小時，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得。

5、測定方法與限度要求

分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10 µL，注入小黄鸭官网下载，測定記錄色譜圖，按外標法以峰麵積計算大豆苷元和染料木素的含量。

2025版藥典限度要求：按幹燥品計算，淡豆豉中含大豆苷元和染料木素的總量不得少於0.10%。

4、實驗結果與分析

1、色譜分離使用Supersil ODS2色譜柱進行分析，淡豆豉供試品溶液的色譜圖如下：

圖1. 淡豆豉供試品溶液在Supersil ODS2色譜柱上的分離色譜圖

色譜峰，1-大豆苷元，2-雜質1，3-雜質2，4-染料木素

從圖1可見，在該色譜條件下，大豆苷元(保留時間15.150 min)與染料木素(保留時間35.541 min)得到良好分離，且與相鄰雜質峰完全分開。係統適用性參數顯示，大豆苷元峰的塔板數為13233，拖尾因子為0.985；染料木素峰的塔板數為13246，拖尾因子為0.978，均符合藥典要求。

2、色譜柱的選擇

為選擇合適的色譜柱，實驗對比了六種不同色譜柱對淡豆豉供試品的分離效果，關鍵分離參數如表1所示：

表1. 不同色譜柱對淡豆豉供試品的分離效果對比

從表1可以看出，測試的6種色譜柱都能分離出大豆苷元（峰1）和染料木素（峰4），但在小黄鸭福利导航Supersil ODS2和SinoChrom ODS-AP色譜柱上能夠分離出2個雜質峰（峰2和峰3），而在在其它色譜柱上僅分離出一個雜質峰，這充分顯示出在藥典規定的色譜條件下，它們對淡豆豉供試品有著優異的分離能力。因此，選擇Supersil ODS2和SinoChrom ODS-AP更有利於藥品質控。但二者相比，使用Supersil ODS2色譜柱能使大豆苷元與雜質更好地分離。另外，各被測組分在Supersil ODS2色譜柱上的峰形對稱性良好（拖尾因子接近1.0），柱效高（塔板數均超過13000），完全滿足2025版《中國藥典》對淡豆豉含量測定的要求。

3、實驗結論

本實驗驗證了使用小黄鸭福利导航EClassical 3200 HPLC係統結合Supersil ODS2色譜柱完全能夠滿足2025版《中國藥典》對淡豆豉含量測定的要求。該方法具有以下優點：

分離效果優異：大豆苷元、染料木素及相鄰雜質峰均得到基線分離，無幹擾。

分析時間合理：完整分析時間約40分鍾，適合常規質量控製。

係統適用性良好：理論板數、拖尾因子等參數均符合藥典要求。

方法專屬性強：通過二極管陣列檢測器可以進一步驗證峰的純度。

5、總結

2025版《中國藥典》大幅提高了淡豆豉的質量標準，特別是將大豆苷元和染料木素的總量限度從0.040%提高至0.10%，這對分析方法的準確性和可靠性提出了更高要求。本文建立的基於小黄鸭福利导航EClassical 3200 HPLC係統的分析方法，采用Supersil ODS2色譜柱，以乙腈-1%冰醋酸水溶液(25:75)為流動相，在260nm檢測波長下，能夠有效分離並準確定量淡豆豉中的大豆苷元和染料木素。通過對比六種不同色譜柱的分離效果，證實了色譜柱選擇對淡豆豉分析方法的重要性，其中Supersil ODS2色譜柱表現出佳的分離性能。該方法準確可靠，重複性好，完全滿足2025版《中國藥典》對淡豆豉含量測定的要求，可為淡豆豉的質量控製提供有力的技術支撐。